微孔滤膜过滤法(又称膜过滤法)是指采用一定孔径等级的无菌孔滤膜截留流体里的微生物,然后转移至合适的培养基上进行培养及菌落计数。该过程常被应用于微生物限度检测和无菌检测。与传统平皿涂布法相比,薄膜过滤法具有不受样品体积限制、可洗去抑制物、高灵敏度等优点。下面一文告诉您微生物检测之膜过滤法的操作步骤。
1.微生物限度过滤器座用75%酒精棉球擦拭,再用火枪灼烧至少1min。用火枪灼烧过滤座的中心、外边缘、下边缘。
2.镊子浸泡在2CM高的95%乙醇里,待过滤器座冷却至室温;用火焰灼烧镊子,冷却4、5秒后夹取滤膜
3.放在滤座上,扣上无菌过滤杯;为了尽量减少膜面受损,钳子夹持滤膜时,只许夹滤膜边缘。
4.用100ml左右的无菌水冲洗瓶胚、瓶、罐、盖,将样品或其冲洗水加到过滤杯中。在旋开瓶盖之前,应对瓶子再次进行振摇,并且只能在过滤台面以下进行振摇,以免污染滤杯和滤膜。
5.取下过滤杯,用火焰燃烧过的镊子夹住滤膜边缘。稍稍打开培养皿的盖子,放薄膜至吸收垫,盖上盖子。用吸水纸吸去过滤座的水珠,再用火枪灼烧过滤器座至少1min,重复操作。所有样品测试完成后,用大量无菌水冲洗过滤,设备,抽滤去残留的水。75%酒精浸泡抽滤系统,灼烧过滤器座,使其表面保持干燥清洁。
膜过滤法的操作步骤可能因具体的应用和实验条件而有所不同,因此在进行微生物检测时,应参考相关标准和操作规程,确保实验的准确性和可靠性。同时,实验过程中需严格遵守实验室的安全规定,确保操作人员的安全。