【行业干货】从原理到实操：一文读懂薄膜过滤法 vs 平皿法的适用边界

一、原理不同

1. 薄膜过滤法

• 核心原理：通过过滤装置将一定体积的供试品溶液通过微孔滤膜（孔径一般为 0.45μm），将微生物截留到滤膜表面，然后将滤膜转移至培养基上进行培养，通过计数滤膜上生长的菌落数来测定供试品中的微生物含量。

• 关键点：利用滤膜的截留作用浓缩微生物，适用于微生物含量较低或含有抑菌成分的供试品。

2. 平皿法

• 核心原理：将一定量的供试品溶液直接接种到琼脂培养基平板中，通过培养后计数平板上生长的菌落数来确定微生物含量。平皿法又可分为倾注法和涂布法：

• 倾注法：将供试品溶液与冷却至 45℃左右的培养基混合后倒入平皿，凝固后培养。

• 涂布法：将供试品溶液均匀涂布于已凝固的培养基表面，培养后计数。

• 关键点：直接利用培养基与供试品接触，适用于不含抑菌成分且微生物含量较高的供试品。

二、操作流程不同

1. 薄膜过滤法

1. 准备滤膜和过滤装置：选择合适孔径的滤膜，安装过滤装置并灭菌。

2. 过滤供试品：将供试品溶液倒入过滤装置，通过抽滤使溶液通过滤膜，微生物截留在滤膜上。

3. 冲洗滤膜：用无菌冲洗液冲洗滤膜，去除供试品中的抑菌成分（若有）。

4. 转移滤膜：将滤膜无菌转移至培养基表面（如营养琼脂、玫瑰红钠琼脂等），滤膜表面朝上。

5. 培养与计数：倒置培养皿，按规定条件培养后，计数滤膜上的菌落数。

2. 平皿法（以倾注法为例）

1. 制备供试品溶液：将供试品溶解或稀释成适宜浓度的溶液。

2. 稀释与接种：取一定体积的供试品稀释液加入灭菌平皿中。

3. 倾注培养基：向平皿中倒入冷却至 45℃左右的培养基，混匀，待凝固。

4. 培养与计数：倒置培养皿，培养后计数平板上的菌落数。

三、适用场景不同

1. 薄膜过滤法

• 适用情况：

• 供试品含有抑菌成分（如抗生素、防腐剂等），需通过冲洗去除抑菌作用。

• 供试品微生物含量较低（如注射剂、纯化水等），需通过过滤浓缩微生物以提高检测灵敏度。

• 液体供试品（如口服液、注射液、饮料等），过滤操作便捷。

• 不适用情况：固体或黏性供试品需先溶解或处理成液体，操作相对复杂；含大量颗粒杂质的供试品可能堵塞滤膜。

2. 平皿法

• 适用情况：

• 供试品不含抑菌成分或抑菌成分已被中和。

• 微生物含量较高的供试品（如食品、化妆品原料等），可直接稀释后检测。

• 固体供试品（如片剂、粉剂等），需先制成均匀混悬液。

• 不适用情况：含强抑菌成分的供试品，直接接种可能导致微生物生长被抑制，结果不准确。

四、优缺点对比

五、注意事项

1. 薄膜过滤法：

• 滤膜孔径需匹配微生物大小（一般 0.45μm 可截留细菌、真菌）。

• 冲洗次数和冲洗液体积需根据供试品特性优化，避免过度冲洗导致微生物损失。

2. 平皿法：

• 倾注法需注意培养基温度，避免高温杀死微生物。

• 涂布法需确保涂布均匀，避免菌落重叠影响计数。

总结

• 选择依据：根据供试品性质（是否含抑菌成分、剂型、微生物含量高低）、检测目的（如微生物限度检查、无菌检查）及实验室条件选择合适的方法。

• 应用趋势：薄膜过滤法因能处理复杂样品且灵敏度高，在药品和高要求领域应用更广泛；平皿法因操作简便，在食品、化妆品初筛中更常见。