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纯化水微生物限度检查法具体是如何做的「操作步骤」

作者:上海恩计仪器 时间:2021-12-16 20:23:26 点击:3136 次

  最近有个客户表示自己是刚刚接触化测的药厂化验员,最近在用微生物限度检测仪做纯化水的微生物检测,他想问问,纯化水微生物限度检查法具体是如何做的。这个好像药典有,但他没找着。希望我们能指点一下!

  大概就是把纯化水永薄膜过滤器滤过,把薄膜放入培养基中培养,但是,他想知道具体一点的。下面我们上海恩计小编就针对客户提出的这个纯化水微生物限度检查法怎么操作的做出具体回答。

纯化水微生物限度检查仪.jpg

  一、纯化水进行微生物限度检查的原因

  在医药的生产过程中,纯化水的质量是关系到药品质量的一个首要原因。纯化水在生产,储存和运输的过程中,非常容易受到微生物的污染,因此对于水质的日常检测是质量部门一个重要工作。对于纯化水微生物限度检查,各国所使用的方法不外乎与培养基浇注法,涂布法,膜过滤法,以及最大可能数法,最大的区别在于所使用的培养基不同。

  二、采用微生物限度检查薄膜过滤法的优点

  采用滤膜法进行微生物检测是一种国际公认的微生物标准检验方法,其得到AOAC、美国、欧洲和日本等国家的药典、FDA和EPA等组织的承认,广泛应用于环境监测、食品及饮料工业、化妆品、制药工业品质控制和电子工业等领域。赛多利斯公司的滤膜法微生物检测产品成功地应用于滤膜法已有20多年的历史,实用而且方便实用,它简化了微生物检测程序。

  滤膜法微生物检测:

  将适当孔径的滤膜放入滤器,过滤样品,由于滤膜的作用而将微生物保留在膜的表面上。样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去。然后,将滤膜放在培养基上培养,营养物和代谢物通过滤膜的微孔进行交换,在滤膜表面上培养出的菌落可以计数,并和样品量相关。

  滤膜法的优点:

  - 与直接法比较,可以检测大量的样品

  - 浓缩效应使微生物检测的准确度提高

  - 带有菌落的滤膜,可作为检测的永久记录存档

  - 可见的菌落和样品量直接对应,得出定量结果

  操作具体一点就是:薄膜过滤法检测,一个样过滤一份,就是200ml的纯化水通过滤膜,将该滤膜浸泡在灭菌好的l生理盐水中,再接种到平皿中,制成10级、100级、1000级稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌稀释培养皿,即可

  三、纯化水微生物限度检查法(薄膜过滤法)操作步骤

  1、取相当于每张滤膜含1g或1ml供试品的供试液,加至适量的稀释剂中,混匀,过滤。若供试品每1g或1ml所含的菌数较多时,可取适量稀释剂的供试液1ml过滤。用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或其他适宜的冲洗液冲洗滤膜,冲洗方法和冲洗量同“计数方法的验证”。冲洗后取出滤膜,菌面朝上贴于营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基平板上培养。每种培养基至少制备一张滤膜。

  2、阴性对照试验 取试验用的稀释液1ml,照上述薄膜过滤法操作,作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。

  3、培养和计数 除另有规定外,细菌培养48小时,逐日点计菌落数,一般以48小时的菌落数报告;霉菌、酵母菌培养72小时,逐日点计菌落数,一般以72小时的菌落数报告;必要时,可适当延长培养时间至5~7天进行菌落计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。点计菌落数后,计算各稀释级供试液的平均菌落数,按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落平均数不少于15,则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。

  4、菌数报告原则 以相当于1g或1ml供试品的菌落数报告菌数;若滤膜上无菌落生长,以<1报告菌数(每张滤膜过滤1g或1ml供试品),或<1乘以稀释倍数的值报告菌数。

  这是我们上海恩计仪器公司的纯化水微生物检测部分内容,请大家参考,以上就是针对客户提出问题的解答。上海恩计仪器是专业生产微生物限度检测仪厂家,我们的微生物限度仪都深受用户的好评,是一家值得信赖的厂家。欢迎广大客户前来咨询订购或到厂考察。

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