微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等,必须经灭菌后方能使用。微生物限度检查仪滤杯灭菌过程参照下面的步骤进行。
利用温度进行灭菌、消毒或防腐,是最常用而又方便有效的方法。高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活,从而起灭菌作用,低温通常起抑菌作用。
1.干热灭菌法:
a.灼烧灭菌法:利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底可靠,灭菌迅速,但易焚毁物品,所以使用范围有限,只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。
b.干热空气灭菌法:这是实验室中常用的一种方法,即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中,升温至160℃,恒温1小时即可。此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。
2.湿热灭菌法:
在同样的温度下,湿热灭菌的效果比干热灭菌好,这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高,容易变性。另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力,从而,加速蛋白质变性而迅速死亡。
a.巴氏消毒法:有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量,如,牛奶、酱油、啤酒等,所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物,这样既保持食物的营养和风味,又进行了消毒,保证了食品卫生。该法一般在62℃,30分钟即可达到消毒目的。此法为法国微生物学家巴斯德首创,故名为巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法:直接将要消毒的物品放入清水中,煮沸15分钟,即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸,则效果更好。此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.间歇灭菌法:上述两种方法在常压下,只能起到消毒作用,而很难做到完全无菌。若采用间歇灭菌的方法,就能杀灭物品中所有的微生物。具体做法是:将待灭菌的物品加热至100℃,15~30分钟,杀死其中的营养体。然后冷却,放入37℃恒温箱中过夜,让残留的芽孢萌发成营养体。第2天再重复上述步骤,三次左右,就可达到灭菌的目的。此法不需加压灭菌锅,适于推广,但操作麻烦,所需时间长。
d.加压蒸汽灭菌法:这是发酵工业、医疗保健、食品检测和微生物学实验室中最常用的一种灭菌方法。它适用于各种耐热、体积大的培养基的灭菌,也适用于玻璃器皿、工作服等物品的灭菌。
加压蒸汽灭菌是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的,以大量蒸汽使其中压力升高。由于蒸汽压的上升,水的沸点也随之提高。在蒸汽压达到1.055公斤/厘米2时,加压蒸汽灭菌锅内的温度可达到121℃。在这种情况下,微生物(包括:芽孢)在15~20分钟便会被杀死,而达到灭菌目的,如,灭菌的对象是砂土、石蜡油等面积大、含菌多、传热差的物品,则应适当延长灭菌时间。
在加压蒸汽灭菌中,要引起注意的一个问题是,在恒压之前,一定要排尽灭菌锅中的冷空气,否则表上的蒸汽压与蒸汽温度之间不具对应关系,这样会大大降低灭菌效果。推荐阅读:微生物限度检查仪如何灭菌 微生物限度检查仪使用方法
我们微生物限度仪滤杯配有一次性杯子和不锈钢杯子两种,一次性塑料杯采用的是火焰灭菌枪对滤头进行高温灭菌。不锈钢杯子可以反复使用采用的是湿热灭菌。火焰灭菌枪灭菌很简单,我们来详细讲下湿热灭菌。
一、灭菌前准备
1、所有需经灭菌的物品首先要清洗晾干,玻璃器皿如吸管、平皿用纸包装严密,如用金属筒应将上面气孔打开。
2、装培养基的三角瓶塞好棉塞,用纸包好,试管盖好盖,注射器须将管芯抽出,用纱布包好。
二、装放
1、大型高压蒸气锅:放置灭菌物品不应超过锅内容积的80%,物品应放置锅内搁架上或铁丝筐中。
2、手提式高压锅:将物品分别包扎好,直接放入消毒筒内,物品之间不能过挤。
三、设备检查
1、检查门的开关是否灵活,橡皮圈有无损坏,是否平整。
2、压力表蒸气排尽时是否停留在零位,关好门和盖,通蒸气或加热后,观察是否漏气,压力表与温度计所标示的状况是否吻合,管道有无堵塞。
3、对有自动电子程序控制装置的灭菌器,使用前应检查规定的程序,是否符合于进行灭菌处理的要求。
四、灭菌处理
手提式高压锅或立式压力蒸气灭菌器的使用应按下列步骤进行:
1、手提式高压锅在主体内加入3L清水,立式高压锅加水16L(重复使用时应将水量补足,水变混浊需要更换)。
2、手提式压力锅将顶盖上的排气管插入消毒桶内壁的方管中(无软管或软管锈蚀破裂的灭菌器不得使用)。
3、盖好顶盖拧紧,勿使漏气;通上电源,并打开顶盖上的排气阀放出冷气(水沸腾后排气10~15min)。
4、关闭排气阀,使蒸气压上升到规定要求,并维持规定时间(按灭菌物品性质与有关情况而定)。
5、达到规定时间后,对需干燥的物品,待压力恢复到零时,即可打开排气阀,自然冷却至60℃后开盖取物,如为液体物品,不要打开排气阀,而应立即将锅去除热源,待自然冷却,压力恢复至零,温度降到60℃以下再打开盖取物,以防止突然减压液体剧烈沸腾活容器爆破。
五、灭菌温度与时间
压力蒸气灭菌锅灭菌温度与时间见下表:
物品 灭菌时间min
115℃ 121℃
不含糖等耐热培养基
15
含糖类等耐热培养基 15-20
染菌培养物
30
器械器皿
30
六、灭菌处理
灭菌后物品,按正常情况已属无菌,从灭菌器中取出应仔细检查,以免再度污染。
1、物品取出,随即检查包装的完整性,若有破坏或棉塞脱掉,不可作为无菌物品使用。
2、取出的物品,如为包装有明显的水浸者,不可作为无菌物品使用。
3、培养基或试剂等,应检查是否符合达到灭菌后的色泽或状态,未达到者应废弃。
4、取出的物品掉落在地或误放不洁之处,或沾有水液,均视为受到污染,不可作为无菌物品使用。
5、取出的合格灭菌物品,应存放于贮藏室或防尘柜内,严禁与未灭菌物品混放。
6、凡属合格物品,应标有灭菌日期及有效期限。
7、每批灭菌处理完成后,记录灭菌品名、数量、温度、时间、操作者。
以上就是对微生物限度检查仪滤杯灭菌过程的回答,当然整个微生物限度检查仪灭菌也可以参照我的方法进行。上海恩计是一家专门生产销售微生物限度检查仪厂家,产品质量可靠,我们一直秉承客户至上的原则,让我们的客户放心购买我们的产品,不后悔自己的决定。买过的客户也对我们的产品赞不绝口。如果你有这方面的需求,可拨打下方的电话。
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