新手在进行纯化水微生物限度检查时很多步骤不是特别清楚，首先我们要熟悉药典，了解清楚才能刚好的做实验，清楚每个步骤，再来实际操作，中间有很多细节需要我们掌握。下面小编就来详细介绍一下。
第一步:培养基配制
为了确保实验的顺利进行，培养基的配制成为了首要任务。有两种选择可供选择：一是直接购买现成的培养基，省时省力;二是按照《中国药典》的配方自行配制，这需要一定的技巧和耐心。在自行配制的过程中，由于未能及时搅拌，可能会导致烧杯在加热时炸裂，因此认真阅读说明书和细心观察加热过程至关重要。
第二步:全面灭菌，确保无菌环境
配制好的培养基和实验所需的各种器具都需要进行灭菌处理，以确保实验环境的无菌。在灭菌前，应充分考虑实验过程中可能用到的器具，如移液管、滤膜、剪刀和镊子等，并逐一进行灭菌处理。
灭菌时，要多考虑一些，试验的时候会用到什么器具?比如:
①药典规定取本品不少于1ml，是不是要准备1ml的移液管或者移液枪?
②滤膜是不是要灭菌?
③试验过程是不是需要剪刀、镊子等。
第三步:倒平皿.
灭菌结束，就可以进入微生物限度室(提前打扫卫生、消毒)进行培养基分装了:置直径90mm的无菌平皿中，注入15~20ml温度不超过45C溶化的R2A琼脂培养基，混匀，凝固，倒置，静待使用。
第四步:实验
无论是采用微生物限度仪还是传统的玻璃过滤器，其相关配件(如滤杯、底座等)都要提前灭菌。纯化水微生物限度的检测过程，整体比较简单:取1ml纯化水，混合至含不少于100ml(一般都选100ml;也有企业:取2ml纯化水混合至198ml,分两次过滤)适宜稀释液(pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液)的无菌容器中，混匀，立即过滤，菌面朝上贴于培养基上。
第五步:培养
实验结束后，按照《中国药典》的要求，将培养皿放置在适宜的温度下进行培养。耐心等待至少5天，期间不断观察微生物的生长情况，并做好记录。
第六步:查看空白对照平皿
最后一步是查看空白对照平皿，以排除实验过程中的干扰因素。仔细观察对照平皿中的微生物生长情况，并与实验平皿进行对比和分析。这一过程虽然短暂，但却是对整个实验过程的一次全面检验和总结。
台上三分钟，台下十年功。真正在超净工作台进行薄膜过滤操作的过程，时间很短，但前处理时间很长，要准备的前期工作很杂，要心细，不能遗漏。通过这次实验，深刻体会到了微生物实验的复杂性和精细性。每一步操作都需要细心、耐心和严谨的态度，只有这样才能确保实验结果的准确性和可靠性。
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