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新手在进行纯化水微生物限度检查需要掌握哪些步骤,这篇您值得收藏

作者:上海恩计仪器 时间:2024-04-19 20:12:46 点击:160 次

  新手在进行纯化水微生物限度检查时很多步骤不是特别清楚,首先我们要熟悉药典,了解清楚才能刚好的做实验,清楚每个步骤,再来实际操作,中间有很多细节需要我们掌握。下面小编就来详细介绍一下。

  第一步:培养基配制

  为了确保实验的顺利进行,培养基的配制成为了首要任务。有两种选择可供选择:一是直接购买现成的培养基,省时省力;二是按照《中国药典》的配方自行配制,这需要一定的技巧和耐心。在自行配制的过程中,由于未能及时搅拌,可能会导致烧杯在加热时炸裂,因此认真阅读说明书和细心观察加热过程至关重要。

微生物限度仪5.jpg

  第二步:全面灭菌,确保无菌环境

  配制好的培养基和实验所需的各种器具都需要进行灭菌处理,以确保实验环境的无菌。在灭菌前,应充分考虑实验过程中可能用到的器具,如移液管、滤膜、剪刀和镊子等,并逐一进行灭菌处理。

  灭菌时,要多考虑一些,试验的时候会用到什么器具?比如:

  ①药典规定取本品不少于1ml,是不是要准备1ml的移液管或者移液枪?

  ②滤膜是不是要灭菌?

  ③试验过程是不是需要剪刀、镊子等。

微生物限度仪131.jpg

  第三步:倒平皿.

  灭菌结束,就可以进入微生物限度室(提前打扫卫生、消毒)进行培养基分装了:置直径90mm的无菌平皿中,注入15~20ml温度不超过45C溶化的R2A琼脂培养基,混匀,凝固,倒置,静待使用。

  第四步:实验

  无论是采用微生物限度仪还是传统的玻璃过滤器,其相关配件(如滤杯、底座等)都要提前灭菌。纯化水微生物限度的检测过程,整体比较简单:取1ml纯化水,混合至含不少于100ml(一般都选100ml;也有企业:取2ml纯化水混合至198ml,分两次过滤)适宜稀释液(pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液)的无菌容器中,混匀,立即过滤,菌面朝上贴于培养基上。

  第五步:培养

  实验结束后,按照《中国药典》的要求,将培养皿放置在适宜的温度下进行培养。耐心等待至少5天,期间不断观察微生物的生长情况,并做好记录。

微生物限度过滤支架1.jpg


  第六步:查看空白对照平皿

  最后一步是查看空白对照平皿,以排除实验过程中的干扰因素。仔细观察对照平皿中的微生物生长情况,并与实验平皿进行对比和分析。这一过程虽然短暂,但却是对整个实验过程的一次全面检验和总结。

  台上三分钟,台下十年功。真正在超净工作台进行薄膜过滤操作的过程,时间很短,但前处理时间很长,要准备的前期工作很杂,要心细,不能遗漏。通过这次实验,深刻体会到了微生物实验的复杂性和精细性。每一步操作都需要细心、耐心和严谨的态度,只有这样才能确保实验结果的准确性和可靠性。

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